XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HOẠT LỰC ENZYM NATTOKINASE TRONG THỰC PHẨM BẢO VỆ SỨC KHOẺ BẰNG QUANG PHỐ HẤP THỤ PHÂN TỬ

Nguyễn Văn Sỹ1, , Lê Hồng Dũng1
1 Viện Dinh dưỡng, Hà Nội

Nội dung chính của bài viết

Tóm tắt

Mục tiêu: Xây dựng phương pháp xác định hoạt lực enzyme Nattokinase trong thực phẩm bảo vệ sức khoẻ bằng quang phố hấp thụ phân tử (UV-VIS). 

Phương pháp: Hoạt lực enzyme Nattokinase trong mẫu thử được xác định gián tiếp thông qua việc ước tính dịch thuỷ phân của nó. Sau phản ứng tiêu sợi huyết, sản phẩm thuỷ phân hoà tan của Nattokinase được đo ở bước sóng 275 nm. 

Kết quả: Các điều kiện tối ưu của quá trình chiết tách đã được khảo sát, phản ứng được tiến hành ở pH 8,5, nhiệt độ phản ứng là 37 °C và thời gian phản ứng là 60 phút. Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) của phương pháp lần lượt là 4,4 (FU/g) và 14,8 (FU/g). Độ lặp lại (RSDr) và độ tái lặp nội bộ (RSDR) của phương pháp nằm trong khoảng từ 1,9 đến 5,4 %. Phương pháp được ứng dụng để xác định hoạt lực enzyme Nattokinase trong 10 mẫu thực phẩm bảo vệ sức khoẻ thu thập tại Hà Nội, kết quả phân tích cho thấy hoạt lực enzyme Nattokinase trong 10 mẫu nằm trong khoảng từ 77,0 đến 96,2 % so với giá trị công bố trên nhãn sản phẩm. 

Kết luận: Các thông số thẩm định của phương pháp đạt yêu cẩu theo Hiệp hội hợp tác phân tích chính thống (AOAC). Phương pháp sử dụng thiết bị đơn giản, kết quả thẩm định có độ tin cậy cao do vậy có thể sử dụng để nghiên cứu sản xuất thực phẩm bảo vệ sức khoẻ chứa enzyme Nattokinase cũng như kiểm soát chất lượng của các loại thực phẩm bảo vệ sức khoẻ trên thị trường.

Chi tiết bài viết

Tài liệu tham khảo

1. World Health Organization. Cardiovascular diseases. Accessed Feb 2, 2024 at https://www.who.int/health-topics/cardiovascular-diseases#tab=tab_1
2. Akhilesh Modi, Ishan Raval, et al. Heterologous expression of recombinant Nattokinase in Escherichia coli BL21(DE3) and media optimization for overproduction of Nattokinase using RSM. Protein Expression and Purification, 203 (2024), 106198-106212.
3. Hongjie Chen, Jiepeng Chen, et al. Effective management of atherosclerosis progress and hyperlipidemia with Nattokinase: A clinical study with 1,062 participants. Cardiovascular Therapeutics, 9 (2022), 964977-964986.
4. Japan Nattokinase Association. Assay method of Nattokinase. http://j-Nattokinase.org/en/index.html Truy cập 27/8/2025
5. T. Astrup and S. Müllertz, “The fibrin plate method for estimating fibrinolytic activity”, Archives of Biochemistry and Biophysics, vol. 40, no. 2, pp. 346¬351, 1952.
6. AOAC Official Method Analysis (2016). Appendix F. Guidelines for Standard Method Performance Requirements. Appendix F, p.2.